人工合成寡核苷酸探针,是以核苷酸为原料,利用DNA合成仪,人工合成的生物探针,属于核酸探针的一种。从细胞中提取出来的DNA片段,存在高度重复的序列,人工合成寡核苷酸探针根据目的基因设计,避免了这一缺点。
人工合成寡核苷酸探针经过示踪物标记,与样品中核酸分子进行杂交,当样品中存在与其互补的核酸序列,二者相连形成双链,之后未杂交探针被洗去,通过探针标记物的自显影、发光效果,对人工合成寡核苷酸探针进行检测,进而测定样品中是否含有与人工合成寡核苷酸探针互补的核酸序列。
人工合成寡核苷酸探针可以识别目的基因序列中一个碱基的变化,即通过杂交来识别单个碱基突变、单个碱基错配情况;人工合成寡核苷酸探针可以利用酶、荧光染料进行标记;人工合成寡核苷酸探针一次合成可得到大量产品,成本较低。
但人工合成寡核苷酸探针的长度必须适中,太长或者太短都会导致杂交过程出现问题;且由于人工合成寡核苷酸探针片段较短,携带的标记物较少,又采用的是非放射性同位素标记,敏感度有限;此外人工合成寡核苷酸探针与mRNA杂交形成的双链,稳定性低于cRNA探针与mRNA形成的双链。
核酸探针细分产品主要包括DNA探针、cDNA探针、cRNA探针、人工合成寡核苷酸探针四种,前三种均为克隆产品,而后一种为人工合成产品,更易于大批量生产,因此在生命科学实验、生物医药原料药制备等领域应用广泛。此外,人工合成寡核苷酸探针还可以应用到基因诊断、个体化用药分析等方面。
新思界
行业分析人士表示,DNA合成仪是自动化合成结构类似DNA或RNA的寡核苷酸的仪器,是人工合成寡核苷酸探针行业的核心上游设备,其设计、研发、生产技术壁垒高。近年来,受生物学、医学、药学等行业快速发展,我国市场对DNA合成仪需求快速增长。目前,我国已经具备DNA合成仪生产能力,但产品品质与进口产品相比存在较大差距,对我国人工合成寡核苷酸探针行业发展造成一定不利影响。